Estudo da degradação da proteína Tau hiperfosforilada por vias independentes do proteassoma, em modelo experimental de neurodegeneração / Study of hyperphosphorylated Tau protein degradation by proteasome-independent pathways, in an experimental model of neurodegeneration

O desenvolvimento das doenças neurodegenerativas, como a doença de Alzheimer, está associado à presença de agregados proteicos contendo Tau hiperfosforilada (p-Tau). Esta disfunção da Tau leva a prejuízos na homeostase celular. Um mecanismo chave para diminuir e/ou prevenir os danos promovidos pelos agregados contendo Tau seria o estímulo de sua degradação. Neste sentido, a proposta do presente estudo foi analisar a degradação da proteína Tau após aumento da expressão exógena da cochaperona Bag-2, a qual influencia o sistema proteassomal de degradação; bem como avaliar a ativação dos sistemas de degradação, a fim de correlacionar estes sistemas em cultura de células primárias e organotípica do hipocampo de ratos. Os resultados mostraram que a rotenona foi capaz de aumentar os níveis de p-Tau e que a superexpressão de Bag-2, foi eficiente em prevenir e degradar a p-Tau. O mecanismo envolvido neste processo envolve a coordenação dos sistemas proteassomal e lisossomal, já que a Rab7 e a Rab24 (envolvidas na via lisossomal) mostraram-se diminuídas na fase que antecede a agregação proteica, enquanto houve aumento da Rab24 na presença dos agregados proteicos. Com relação ao peptídeo beta amiloide, foi demonstrado tendência de aumento de p-Tau acompanhado de diminuição da atividade proteassomal e lisossomal. O tratamento com PADK (ativador lisossomal) foi capaz de reverter este efeito nestas diferentes condições. A análise da interrelação entre os sistemas mostrou que uma inibição do proteassoma favorece a via lisossomal e que o inverso não se repete. Os resultados sugerem que a modulação das vias de degradação pode ser interessante para o estudo, prevenção e tratamento das doenças neurodegenerativas associadas à agregação de proteínas...

Neurodegenerative diseases, such as Alzheimer's, are associated to protein inclusions containing hyperphosphorylated Tau (p-Tau). It is well established that Tau dysfunction impairs cell homeostasis. A key mechanism to prevent and/or reduce the damage promoted by aggregates of Tau might be its degradation. In view of this, the aims of the present study are to evaluate p- Tau clearance following exogenous expression of Bag-2, which stimulates proteasome; as well as to analyze the activation of both lysosome and proteasome pathways in order to understand the crosstalk between these two systems in primary and organotypic cultures of rat hippocampus. Results showed that rotenone was able of increasing p-Tau that was prevented and degraded by Bag-2 overexpression. Mechanisms involved in this process involve the coordination of cell degradation systems, depending upon aggregation status, since Rab7 and Rab24 (involved in lysosomal pathway) were decreased before protein aggregation, while Rab24 increased in the presence of protein inclusions. Amyloid-beta peptide also increased p-Tau accompanied by decreased proteasome and lysosome activity. PADK (lysosomal activator) treatment reverted the inhibition promoted by amyloidbeta peptide. Inhibition of proteasome leads to activation of lysosome, but lysosome inhibition does not affect proteasome. Overall, results suggest that targeting degradation pathways might be useful to understand, prevent and treat neurodegenerative diseases associated with protein deposits...

Avaliação da função hepática de ratas da linhagem Lewis frente à ingestão de álcool associada a periodontia induzida por ligadura / Evaluation of liver function in wistarfemale Lewis ahead of alcohol associated with ligature-induced periodontitis

Objetivo: o presente estudo tem por objetivo avaliar a função hepática frente à ingestão de álcool associado com a periodontite induzida por ligadura em ratas Lewis. Materiais e Métodos: os 24 animais foram divididos nos grupos: álcool+ligadura-GA (n=8), ligadura-GL (n=8) e controle negativo -GCN (n=8). Para a análise dos resultados foram adotados os parâmetros bioquímicos – aspartato aminotransferase (ASTTGO) e transaminase glutâmica pirúvica (ALTTGP). Os animais foram submetidos à ingestão de solução alcoólica a 20%, ao longo de um período de 60 dias. Para o procedimento de indução da doença periodontal, os animais do GA e GL receberam anestesia geral. Resultados: os resultados do trabalho demonstraram ausência de diferença estatística (p>0,05) para as variáveis ASTTGO e ALTTGP paras os grupos GA, GL e GCN. Conclusão: conclui-se que a ingestão de álcool na dosagem praticada, associado à periodontite induzida por ligadura não modificou os exames de bioquímica ASTTGO e ALTTGP em ratas Lewis.

Objective: This study aims to assess liver function before the intake of alcohol associated with ligature-induced periodontitis in rats Lewis. Materials and Methods: These 24 animals were divided into two groups: alcohol + GA-ligation (n = 8), ligation-GL (n = 8) and negative control-GCN (n = 8). For the analysis of the results were used biochemical parameters – aspartate aminotransferase (AST AST) and glutamic pyruvic transaminase (ALT TGP). The animals were submitted to the ingestion of alcoholic solution at 20% over a period of 60 days. For the induction of periodontal disease, animals in the GL and GA general anesthesia. Results: The results demonstrated no statistical difference (p> 0.05) for the variables AST AST and ALT TGP paras the GA, GL and GCN. Conclusion: We conclude that alcohol intake at a dose practiced, associated with ligature-induced periodontitis did not modify the biochemical tests AST AST and ALT TGP Lewis in rats.

Avaliação histológia do processo de reparo em feridas cutâneas provocadas no dorso de ratos da linhagem endogâmica Lewis e Fischer-344 / Histologic evaluation of the repair of cutaneous produced in Lewis (Hyporeactive) and Fischer - 344 (hyperreactive) endogamic rats

Neste trabalho avaliou-se histologicamente o reparo em feridas cutâneas no dorso de ratos hiperreativos (Fischer-344) e hiporreativos (Lewis). Quarenta ratos adultos foram selecionados, sendo 20 da linhagem Fischer (Grupo F) e outros 20 da linhagem Lewis (grupo L). Os animais foram anestesiados e uma ferida com área de 1 cm² foi feita no dorso de cada animal até atingir o tecido subcutâneo, preservando-se o músculo. Após 7 e 14 dias de realizadas as feridas, dez ratos de cada grupo foram selecionados aleatoriamente e submetidos à eutanásia. Os tecidos da região da ferida foram removidos e fixados em formalina para o processamento histológico laboratorial. Para análise histológica, um examinador cego aos grupos observou todos os cortes, identificando e analisando a região central e as bordas da ferida. No sétimo dia, o Grupo F apresentou discreta proliferação de epitélio junto às bordas da ferida. No tecido conjuntivo subjacente mais distante da ferida, observaram-se poucos fibroblastos e elevada quantidade de macrófagos e linfócitos. O grupo L apresentou alta proliferação epitelial e moderada quantidade de fibroblastos próximos a macrófagos e linfócitos. Aos 14 dias, o Grupo F apresentou discreta proliferação de epitélio. No tecido conjuntivo, foi observado poucos fibroblastos e moderado número de linfócitos e macrófagos. No grupo L, o epitélio recobria totalmente a ferida. No tecido conjuntivo, raros linfócitos e macrófagos foram observados. Concluindo, ratos do Grupo L (hiporreativos) apresentam um melhor reparo de feridas cutâneas em dorso que os ratos do Grupo F (hiperreativos).